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合成乐竞体育手机官网 的切割流程
一,什么是“切割”?
切割是生产乐竞体育手机官网 中的一个步骤,从化学的角度来说,就是把乐竞体育手机官网 从树脂上分离并去掉乐竞体育手机官网 侧链和主链多余的临时保护基团。
(以下所有的切割都针对树脂的处理)
二,切割的前后流程。
1,准备待切割的树脂
这里只需要树脂里面的溶剂成分被洗涤掉并充分干燥树脂,理想状态是:像干燥的沙子一样,不容易占到其它物体的表面,例如瓶子或者纸。
2,切割液的选择和配置
这方面资料在网上也有很多,针对不同的乐竞体育手机官网 序列,选择不同的切割液种类。
这里主要列几种常见的切割液比例。
1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5:5:2.5:2.5:2.5
前两种适合没有容易氧化的乐竞体育授权 ,例如Trp、Cys、Met。第三种都可以使用。
(每1g树脂加8ml左右的切割液)
3,切割过程
常规的时间在2.5小时左右,要不停地震荡,温度为室温。
一些非常容易氧化或者变质的乐竞体育手机官网 ,还需要排除容器里面的空气(用氮气代替),有时还需要适当降低环境的温度,例如0-10℃。
4,抽滤收集滤液
抽滤的方法很多,每个实验室都有自己的方法,小编主要说下,这是的滤液里面含有被切割下来的乐竞体育手机官网 和一部分侧链保护基团。一些不溶于TFA的保护基团,例如Pbf,是一种白色漂浮物,同树脂一起被过滤掉了。
5,沉淀、离心、洗涤
一般认为这个步骤是最影响收率的一步,处理不好的话,就会损失很多乐竞体育手机官网 。
1)溶剂:沉淀用的是冰乙醚,这里的冰字是要求乙醚的温度要很低,例如放置在-20摄氏度的冰箱里面。当然使用常温的乙醚,也是可以的。
乙醚和滤液的体积比为6:1比较合适。
2)仪器:能达到3000转每分钟的离心机
3)方法:在时间允许的情况下,小编建议把滤液往6倍体积的冰乙醚慢慢地滴加,可以用磁力搅拌器搅拌冰乙醚。目标是让刚加进去的滤液立刻析出乐竞体育手机官网 。
4)离心:把已经析出,变白的溶液离心即可。
5)洗涤:一般建议洗涤3次,每一次都要把溶液搅拌均匀。
6,抽干、的到粗品肽
离心3次之后的肽,各种侧链保护基团基本被乙醚洗涤了,这时只要将湿的乐竞体育手机官网 放到真空釜抽干即可。(别放恒温箱里面)